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猪肉和牛肉组织中头孢菌素类抗生素的固相萃取净化方法
  • 发布日期:2010-05-27      浏览次数:3877
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      猪肉和牛肉组织中头孢菌素类抗生素的固相萃取净化方法
      1. 萃取
      a. 10g肌肉样品中加入40mL醋酸铵缓冲液(pH5.0,0.05mol/L),匀浆;
      b. 加入10mL异辛烷,用漩涡混合器混合均匀;
      c. 2400r/min离心10min;
      d. 将上清液转移到玻璃试管中。
      2. SPE净化
      a. 活化:分别用5mL甲醇,5mL超纯水以及5mL醋酸铵缓冲液(pH5.0,0.05mol/L)分别淋洗C18吸附剂柱床;
      b. 上样:将玻璃试管中萃取后的上清液倾倒入SPE中;
      c. 淋洗:用2mL的醋酸铵缓冲液(pH5.0,0.05mol/L),1mL的超纯水和1mL的去离子水/乙腈( 90:10,V/V) 分别淋洗柱床,去除干扰杂质;
      d. 干燥:柱管通空气,抽气5min;
      e. 洗脱:加2mL去离子水/乙腈(90:10,V/V)洗脱液,进行洗脱,流速控制在3mL/min,收集洗脱液;
      f . 氮吹干燥:50℃ 条件下,氮气吹扫,蒸发至大约4μL左右;
      g. 定容:用醋酸铵缓冲液(pH7.0,0.025mol/L)和0.1M的NaOH调节到pH7.0,并定容至1.6mL。
      3. LC-UV检测
      4. 样品成分
      头孢喹诺
      头孢氨苄
      头孢匹林及其代谢物Desacetylcephapirin
      头孢噻呋及其代谢物Desfuroylceftiofur
      本方法中使用的SPE柱:
      Bond Elut C18( 500mg, 6mL, PN.12102052 )。
       
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